Kloniranje, izražajnost i pročišćavanje bjelančevine 28 iz vanjske membrane Salmonelle enterice serovar Typhimurium za razvoj podjediničnog cjepiva

“Ovim je istraživanjem zaključeno da Omp28 može poslužiti kao učinkoviti kandidat za razvoj r-DNA cjepiva protiv salmoneloze.

Mamta Pandey ; Animal Biotechnology Center, Department of Veterinary Physiology and Biochemistry, College of Veterinary and Animal Sciences, Govind Ballabh Pant University of Agriculture and Technology, Pantnagar, India
Mumtesh K. Saxena ; Animal Biotechnology Center, Department of Veterinary Physiology and Biochemistry, College of Veterinary and Animal Sciences, Govind Ballabh Pant University of Agriculture and Technology, Pantnagar, India
Anjani Saxena ; Animal Biotechnology Center, Department of Veterinary Physiology and Biochemistry, College of Veterinary and Animal Sciences, Govind Ballabh Pant University of Agriculture and Technology, Pantnagar, India
Richa Jha ; College of Basic Science and Humanities, Govind Ballabh Pant University of Agriculture and Technology, Pantnagar, India
Sunil K. Rastogi ; Animal Biotechnology Center, Department of Veterinary Physiology and Biochemistry, College of Veterinary and Animal Sciences, Govind Ballabh Pant University of Agriculture and Technology, Pantnagar, India
Rajesh Kumar ; Department of Veterinary Microbiology, College of Veterinary and Animal Sciences, Govind Ballabh Pant University of Agriculture and Technology, Pantnagar, India

Prenešeno iz časopisa VETERINARSKI ARHIV ■ otvori članak ↗

SAŽETAK

VETERINARSKI ARHIV Vol.88 No.4 Srpanj 2018. ↗

Salmonella Typhimurium glavni je gastrointestinalni patogen koji je globalna prijetnja ljudskome zdravlju. Javnozdravstveni problemi povezani s ovim organizmom povećali su se do te mjere da je postao glavno pitanje na koje se traže brojni odgovori. Bakterija postaje otporna na najčešće dostupne antibiotike, a ograničavajuća uporaba cjepiva povezana je s kratkotrajnim imunitetom. Zbog toga postoji hitna potreba za razvoj učinkovitog cjepiva.
Vanjske bjelančevine membrane (engl. Outer membrane proteins, Omps) salmonele dokazale su svoju sposobnost kandidata za razvoj cjepiva koje bi se koristilo u prevenciji salmoneloze. S tim je ciljem u ovom radu, pod uvjetima IPTG indukcijskog sustava, provedeno umnažanje i kloniranje te provjerena izražajnost gena za Omp28 iz Salmonelle Typhimurium. Tako dobivena rekombinantna bjelančevina pročišćena je i testirana s obzirom na antigenu sposobnost.
Antigena sposobnost pročišćene bjelančevine potvrđena je uporabom Western blot metode s antiserumom protiv Omps-a iz S. Typhimurium dobivenim od zeca. Genom Omp28 umnožen je kao 330bp produkt. Bjelančevina je imala približno 28 kDa i Western blot analizom pokazala je izraženost jakog signala.
Ovim je istraživanjem zaključeno da Omp28 može poslužiti kao učinkoviti kandidat za razvoj r-DNA cjepiva protiv salmoneloze.

Ključne riječi: kloniranje; izražajnost; Omp28; Salmonella Typhimurium; cjepivo; Western blot

Full text (eng.) ↗

Vezani sadržaji