Izlaganje sa skupaVeterinarska djelatnost

Regenerativna veterinarska medicina – načela primjene mezenhimalnih matičnih stanica

Nina Krešić, Ivana Šimić, Ivana Lojkić, Tomislav Bedeković
Laboratorij za bjesnoću i opću virologiju, Hrvatski veterinarski institut, Zagreb

Izvor: Zbornik radova 6. HRVATSKI VETERINARSKI KONGRES

Sažetak


HRVATSKI VETERINARSKI INSTITUTRegenerativna veterinarska medicina usmjerena je na iskorištavanje sposobnosti adultnih matičnih stanica i organizma za obnavljanjem oštećenih tkiva. Zanimljiv, obilat i pristupačan izvor adultnih mezenhimskih matičnih stanica (AD-MSCs – adipose derived- mesenchymal stem cells), u organizmu je i masno tkivo. Svojim jedinstvenim osobinama, AD-MSCs imaju mogućnost revolucionalizirati trenutno područje farmaceutike. Raznolikost u kvaliteti stanica različitih donora i tkiva, neujednačeni protokoli izdvajanja stanica, različite doze i načini primjene ograničavaju njihov terapijski učinak. Stoga, prioritet regenerativne veterinarske medicine ostaje uporaba proizvoda očuvanih funkcionalnih karakteristika, poznatog sastava, odgovarajuće čistoće, pripremljenih prema načelu dobre laboratorijske prakse (Good Laboratory Practice – GLP). Proizvodnja industrijskih razmjera i dalje je izazov za znanstvenike diljem svijeta, a personalizirani, individualizirani pristup svakom pacijentu s obzirom na vrstu, tjelesnu težinu, uznapredovalost patološkog procesa predstavlja siguran odabir. Na Hrvatskom veterinarskom institutu od 2014. godine provodi se kultivacija psećih i mačjih mezenhimalnih matičnih stanica iz masnog tkiva. S ciljem zadovoljavanja postojećih kriterija u pripremi stanica za primjenu u terapiji, izdvojene stanice podvrgavaju se analizama ekspresije površinskih biljega na protočnom citometru, funkcionalnim diferencijacijskim testovima, kao i analizi gena koje stanice eksprimiraju u in vitro okolišu pomoću array tehnologije.


Ključne riječi: mezenhimske matične stanice, regenerativna medicina

Karakteristike matičnih stanica


Sposobnost samoobnavljanja, preobrazbe u različite stanične tipove i djelovanja na imunosni sustav samo su neka od jedinstvenih obilježja mezenhimskih matičnih stanica (MSCs), koja ih čine prikladnima za terapijsku primjenu u regenerativnoj medicini (MACHADO i sur., 2013.; ULLAH i sur., 2015.).

Međunarodno društvo za staničnu terapiju (International Society for Cellular Therapy – ISCT) odredilo je minimalne kriterije koji definiraju MSCs (DOMINICI i sur., 2006.; KFOURY i sur., 2015.). Unatoč tomu, životinjske mezenhimske matične stanice (MSCs) su mnogo slabije okarakterizirane u odnosu na ljudske (TAKEMITSU i sur., 2012.; SCRAVEN i sur., 2014). Stvaranje dovoljnog broja stanica za primjenu u terapiji iziskuje kultivaciju stanica in vitro kroz određeno vrijeme (BELLAYR i sur., 2014.).
Istovremeno, podvgavanje stanica takvim uvjetima uzrokuje kontinuirane promjene u stanicama koje se ogledaju u smanjenoj sposobnosti proliferacije, promjeni veličine stanice i molekularnim promjenama (WAGNER i sur., 2008.). Iako MSCs populacija postaje homogenija serijskim pasažama, neizostavno se pojavljuju promjene u genskoj ekspresiji koje mogu imati utjecaj na učinkovitost terapeutskog djelovanja stanica (WAGNER i sur., 2008.; BELLAYR i sur., 2014.).

Osobine stanica izloženih intenzivnim i nepovoljnim uvjetima u bočici za staničnu kulturu za razliku od idealne “matične” niše u tkivu iz kojega potječu, još uvijek nisu u potpunosti opisane. Utvrđivanje ekspanzijskih, diferencijacijskih i imunofenotipskih osobina psećih matičnih stanica u pasažama koje se koriste u liječenju omogućuje proizvodnju poznatog i dobro karakteriziranog proizvoda, ključnog preduvjeta primjeni matičnih stanica u liječenju.

Matične stanice na Hrvatskom veterinarskom institutu


S ciljem dobivanja stanica poznatih osobina, utvrđivanju identiteta, funkcionalnosti i eksprimiranih gena kultiviranih matičnih stanica na Hrvatskom veterinarskom institutu posvećena je velika pozornost. U primjenjenim laboratorijskim uvjetima AD-MSCs su homogena nediferencirana populacija stanica, očuvane diferencijacijske sposobnosti, stabilno eksprimiranih, za matične stanice specifičnih, površinskih biljega, s jasno eksprimiranim genima specifičnim za mezenhimalne matične stanice i za “matičnost” (eng. stemness).

Budući izazovi za regenerativnu veterinarsku medicinu


Nekoliko je izazova glede kvalitete i sigurnosti primjene stanica, a veliki broj njih odnosi se na proizvodnju i bankiranje stanica ex vivo. I uz porast broja kliničkih studija i vrsta adultnih matičnih stanica korištenih u regenerativnoj medicini, pitanje sigurnosti njihove primjene ostaje najvažnije. To je potaknulo stvaranje smjernica i standarda za prikupljanje uzoraka, izdvajanje stanica, testiranje, bankiranje, pakiranje i distribuciju.
Slijed spomenutih smjernica nužan je, ali istovremeno zahtjevan, za ostvarenje njihova pozitivnog terapeutskog učinka.


Literatura [… prikaži]

Nina Krešić, Ivana Šimić, Ivana Lojkić, Tomislav Bedeković

REGENERATIVE VETERINARY MEDICINE – PRINCPLES OF STEM CELL APPLICATION

Abstract


Regenerative veterinary medicine is directed to use adult stem cell and organism ability to regenerate damaged tissues. Abundant and accessible source of mesenchymal stem cells (MSCs) is fat tissue. Mesenchymal stem cells originated from fat tissue (AD-MSCs) have power to revolutionize current pharmaceutical field. However, numerous factors may limit their therapeutic effect. Thus, the priority of regenerative veterinary medicine remains use of the products with preserved functional characteristics, identity, purity, prepared according to the good laboratory practices (GLPs). Large scale manufacturing is still a challenge for scientist all over the World, while personalized; individualized approach to each patient represents appropriate choice.Isolation, cultivation and preparation of AD-MSCs are performed on Croatian Veterinary Institute since 2014. Isolated cells are analyzed for the presence of specific cluster of differentiation, functionality and expression of genes specific for mesenchymal stem cells with particular attention on stemness genes using array technology.
Key words: mesenchymal stem cells, regenerative medicine

Vezano:


Vezani sadržaji

7. Hrvatski veterinarski kongres

Urednik

Epilepsija u praksi – što sve možemo bez napredne dijagnostike?

Urednik

Javni poziv za iskaz interesa za provedbu subvencioniranog postupka sterilizacije vlasničkih pasa na području Grada Zagreba za 2024.

Urednik

Dok udruge ratuju, životinje i veterinari stradavaju

Urednik

Otvorena nova ambulanta Veterina Branimir

Urednik

Uručene potvrdnice za završen Internship program “Male životinje” u ak. god. 2023./2024.

Urednik

Ova web stranica koristi kolačiće radi poboljšanja korisničkog doživljaja pri njezinom korištenju. Korištenjem ove stranice suglasni ste s tim. Prihvati Više